Описание

Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа A+B – это быстрый хроматографический иммунологический анализ для качественного обнаружения антигенов SARS-CoV-2, вирусов гриппа A и B, присутствующих в носоглотке человека.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПО НАЗНАЧЕНИЮ

Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) – это быстрый хроматографический иммунологический анализ для качественного обнаружения антигенов SARS-CoV-2, вирусов гриппа А и гриппа В в образцах мазков из носоглотки, полученных от лиц с подозрением на SARS-инфекция CoV-2/грипп в сочетании с клиническими проявлениями и результатами других лабораторных исследований.

Результаты предназначены для обнаружения антигенов SARS-CoV-2 и гриппа A+B. Антиген обычно выявляется в образцах верхних дыхательных путей во время острой фазы инфекции. Положительные результаты указывают на наличие вирусных антигенов, но для определения статуса инфекции необходима клиническая корреляция с историей заболевания и другой диагностической информацией. Положительные результаты не исключают бактериальную инфекцию или коинфекцию с другими вирусами. Обнаруженный агент не может быть точной причиной заболевания.
Негативные результаты не исключают заражения SARS-CoV-2/гриппом A+B и не должны использоваться как единственная основа для лечения или принятия решений по лечению пациентов. Негативные результаты следует рассматривать как предположение и подтверждать молекулярным анализом, если это необходимо для лечения пациента. Негативные результаты следует рассматривать в контексте недавнего контакта пациента, истории и наличия клинических признаков и симптомов, соответствующих COVID-19/гриппу A+B.

Быстрый комбинированный тест на антигены COVID-19 и гриппа A+B предназначен для использования обученным персоналом клинической лаборатории.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ

Новые коронавирусы относятся к роду β. COVID-19 – острое респираторное инфекционное заболевание. Люди, как правило, восприимчивы. Сейчас основным источником заражения есть пациенты, инфицированные новым коронавирусом; Бессимптомные инфицированные люди также могут являться источником инфекции. По данным текущего эпидемиологического исследования, инкубационный период составляет от 1 до 14 дней, предпочтительно от 3 до 7 дней. Основные проявления включают в себя лихорадку, усталость и сухой кашель. В некоторых случаях наблюдается заложенность носа, насморк, боли в горле, миалгия и диарея.

Инфлюэнца (широко известная как «грипп») – это очень заразная, острая вирусная инфекция дыхательных путей. Это инфекционное заболевание, которое легко передается при кашле и чихании аэрозольных капель, содержащих живой вирус. Вспышки гриппа происходят ежегодно в осенне-зимние месяцы. Вирусы типа А обычно более распространены, чем вирусы типа В и связаны с наиболее серьезными эпидемиями гриппа, тогда как инфекции типа В обычно более легкие.

Золотым стандартом лабораторной диагностики является 14-дневная культура клеток с одной из разнообразных клеточных линий, способных поддерживать рост вируса гриппа.2 Культура клеток имеет ограниченное клиническое применение, поскольку результаты получаются слишком поздно в клинической картине для эффективного вмешательства в состояние пациента. Полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ЗТ-ПЦР) является более новым методом, который, как правило, более чувствительным, чем культура, с улучшенными показателями обнаружения по сравнению с культурой на 2-23%.3 Однако метод ЗТ-ПЦР является дорогостоящим, сложным и должен производиться в специализированных лабораториях.

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Экспресс-тест на антиген COVID-19 (мазок из носоглотки) представляет собой качественный мембранный иммуноанализ для выявления антигенов SARS-CoV-2 в образце мазка из носоглотки человека. Антитело SARS-CoV-2 покрыто в области тестовой линии. При тестировании образец реагирует с частицами, покрытыми антителами против SARS-CoV-2 в тесте. Затем смесь мигрирует мембрану вверх за счет капиллярного действия и реагирует с антителом против SARS-CoV-2 в области тестовой линии. Если образец содержит антиген SARS-CoV-2, то в области тестовой линии появится цветная линия. Если образец не содержит антиген SARS-CoV-2, в области тестовой линии не появится цветная линия, что указывает на отрицательный результат. Как процедурный контроль в области контрольной линии всегда будет появляться цветная линия, указывающая, что был добавлен надлежащий объем образца и произошло смачивание мембраны.

Быстрый тест на грипп A+B (мазок из носоглотки) — качественный иммунологический анализ с боковым потоком для выявления антигена гриппа A и B в образцах мазка из носоглотки человека. В этом тесте антитела, специфичные вирусам гриппа А и гриппа В, отдельно наносятся на участки тестовой линии. Во время тестирования экстрагированный образец реагирует с антителом к гриппу А и/или гриппу В, покрытым частицами. Смесь мигрирует вверх по мембране, чтобы реагировать с антителом на грипп А и/или грипп В на мембране и создавать одну или две цветные линии в тестовых областях. Наличие этой цветной линии в одной или обеих тестовых областях указывает на положительный результат. Как процедурный контроль, в контрольной области всегда появляется цветная линия, если тест выполнен правильно.

РЕАГЕНТЫ

Тест содержит анти-SARS-COV-2, анти-грипп A и анти-грипп B как реагенты захвата, а также анти-SARS-COV-2, анти-грипп A и анти-грипп B – как реагенты обнаружения.

Предостережение

1. Этот лист-вкладыш необходимо полностью прочитать перед выполнением теста. Несоблюдение указаний во вкладыше к упаковке может привести к неточным результатам теста.
2. Только для профессионального использования в диагностике in vitro. Не использовать по истечении срока годности.
3. Не кушайте, не пейте и не курите в месте, где работают с образцами или наборами.
4. Не используйте тест, если упаковка повреждена.
5. Обращайтесь со всеми образцами так, будто они содержат инфекционные агенты. Соблюдайте установленные меры предосторожности против микробиологической опасности во время сбора, обработки, хранения и утилизации образцов пациентов и использованного содержимого набора.
6. Надевайте защитную одежду, например лабораторные халаты, одноразовые перчатки и средства защиты глаз при анализе образцов.
7. Вирусная транспортная среда (VTM) может повлиять на результат теста, не храните образцы в вирусной транспортной среде; извлеченные образцы для ПЦР-тестов нельзя использовать для теста.
8. Тщательно вымойте руки после работы.
9. Убедитесь, что для тестирования используется соответствующее количество образцов. Слишком большой или слишком малый размер выборки может привести к отклонению результатов.
10. Использованный тест следует утилизировать в соответствии с местными правилами.
11. Влажность и температура могут оказать отрицательное влияние на результаты.

Условия хранения

Хранить в упакованном виде в герметичной упаковке при комнатной температуре или в холодильнике (2-30°C). Тест стабилен в течение срока годности, указанного на запечатанном пакете. Тест должен оставаться в запечатанном пакете до момента использования. НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ. Не использовать по истечении срока годности.

Рекомендации по применению

Сбор образцов

1. Вставьте стерильный тампон в носовой ход пациента, достигая поверхности задней части носоглотки.
2. Произведите тампоном по поверхности задней части носоглотки.
3. Выньте стерильный тампон из носовой полости.

Транспортировка и хранение образцов

Образцы должны быть протестированы как можно скорее после сбора. Если мазки не были обработаны немедленно, рекомендуется поместить образец мазка в сухую, стерильную и плотно закрытую пластиковую пробирку для хранения. Образец мазка в сухом и стерильном состоянии стабилен в течение 8 ч при комнатной температуре и 24 ч при температуре 2-8°С.

Не храните образцы в вирусных транспортных средах.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

Для подготовки образцов мазка следует использовать только экстракционный буфер и входящие в состав набора пробирки.
Пожалуйста, обратитесь к карточке процедуры для получения подробной информации об экстракции образцов.

1. Поместите образец мазка в пробирку для экстракции с буфером для экстракции (примерно 350 мкл). Вращайте тампон в течение примерно 10 секунд, прижимая головку тампона к внутренней стороне пробирки, чтобы высвободить антиген в тампоне.
2. Извлеките тампон, прижимая головку тампона к внутренней части пробирки для экстракции, чтобы удалить как можно больше жидкости из тампона. Утилизируйте тампон в соответствии с протоколом утилизации биологически опасных отходов.

*ПРИМЕЧАНИЕ: Хранение образца после экстракции стабильно в течение 2 часов при комнатной температуре или 24 часов при 2-8°С.

МАТЕРИАЛЫ

Предоставляемые материалы

• Тестовые кассеты • Стерильные тампоны • Вкладываешь в упаковку • Буфер для экстракции
• Пробирки для экстракции и колпачки (опционально) • Рабочая станция • Процедурная карта

Материалы, которые необходимы, но не предоставляются
• Таймер

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Перед тестированием произведите выдержку во времени, чтобы температура тест-кассеты, экстрагированных образцов и/или средств контроля сравнялась с комнатной (15-30°C).

1. Извлеките тест-кассету из запечатанного фольгированного пакета и используйте ее в течение одного часа. Лучшие результаты будут получены, если тест выполнить сразу после открытия фольгированного пакета.
2. Переверните пробирку для экстракции образца и добавьте по 3 капли экстрагированного образца (около 100 мкл) в каждую лунку (лунки) для образца соответственно, а затем запустите таймер.
3. Дождитесь появления цветной линии. Получите результат через 15 минут. Не интерпретируйте результат через 20 минут.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ПОЗИТИВНЫЙ COVID-19:* В левом окне появляются две четкие цветные линии. Одна цветная линия должна быть в контрольной области (C), а другая цветная линия должна находиться в тестовой области (T). Положительный результат в тестовой зоне указывает на обнаружение антигенов COVID-19 в образце.

ПОЗИТИВНЫЙ грипп А:* В правом окне появляются две четкие цветные линии. Одна цветная линия должна находиться в контрольной зоне (С), а другая цветная линия должна находиться в зоне гриппа А(А). Положительный результат в области гриппа А указывает на то, что в образце обнаружен антиген гриппа А.

ПОЗИТИВНЫЙ грипп В:* В правом окне появляются две четкие цветные линии. Одна цветная линия должна находится в контрольной зоне (С), а другая цветная линия должна находиться в зоне гриппа В(В). Положительный результат в области гриппа В показывает, что антиген гриппа B был обнаружен в образце.

Положительные результаты гриппа А и гриппа В:* В правом окне появляются три четкие цветные линии. Одна цветная линия должна находиться в контрольной зоне (С), а две цветные линии должны находиться в зоне гриппа А(А) и зоне гриппа В(В). Положительный результат в зоне гриппа А и зоне гриппа В свидетельствует, что антиген гриппа А и антиген гриппа В были обнаружены в образце.

*ПРИМЕЧАНИЕ: Интенсивность цвета в области тестовой линии (T) будет изменяться в зависимости от количества антигена COVID-19, антигена гриппа А и/или В, присутствующего в образце. Поэтому любой цвет в тестовой области (T/B/A) следует считать положительным.

НЕГАТИВНЫЙ: Появляется одна цветная линия в контрольной области (C). Ни одна видимая цветовая линия не появляется в области тестовой линии (T/B/A).

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ: Не появляется контрольная линия. Недостаточный объем образца или неправильная методика проведения процедуры являются наиболее вероятными причинами отсутствия контрольной линии. Просмотрите процедуру и повторите тест с новой тест-кассетой. Если проблема не исчезает, немедленно прекратите использование тест-системы и обратитесь к местному дистрибьютору.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Внутренний контроль качества

Внутренний процедурный контроль включен в тест. Цветная линия, появляющаяся в контрольной области (С), представляет собой внутренний положительный процедурный контроль. Он подтверждает достаточный объем образца и правильную технику проведения процедуры. Чистый фон представляет собой внутренний отрицательный процедурный контроль. Если тест работает правильно, фон в области результата должен быть от белого до светло-розового и не мешать считыванию результата теста.

Наружный контроль качества

Средства контроля не входят в состав этого набора. Однако, в соответствии с требованиями лабораторной практики (Good Laboratory Practice, GLP) рекомендуется использовать положительные/отрицательные средства контроля.

ОГРАНИЧЕНИЕ

1. При проведении тестирования на наличие антигенов SARS-CoV-2/гриппа А/гриппа В в образцах из носоглотки человека, полученных от лиц с подозрением на заболевание, необходимо четко соблюдать Процедуры тестирования и Интерпретацию результатов тестирования. Для оптимального выполнения теста очень важен правильный отбор образцов. Несоблюдение процедуры может привести к неточным результатам.
2. Эффективность комбинированного экспресс-теста для определения антигена COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) оценивалась только с помощью процедур, приведенных в настоящей инструкции по использованию изделия. Изменения этих процедур могут повлиять на результаты теста. Образец вирусной транспортной среды (ВТС) и образцы, полученные для ПЦР-тестов, не могут использоваться для проведения теста.
3. Быстрый комбинированный тест для определения антигена COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) предназначен только для диагностики in vitro. Этот тест следует использовать для выявления антигенов SARS-CoV-2/гриппа А/гриппа В в образцах из носоглотки человека как вспомогательное средство для диагностики пациентов с подозрением на инфицирование SARS-CoV-2, гриппом А или гриппом В в сочетании с клинической картиной и результатам других лабораторных исследований. Ни количественное значение, ни скорость увеличения концентрации антигенов SARS-CoV-2/гриппа А/гриппа В не могут быть определены с помощью этого качественного теста.
4. Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) лишь указывает на наличие антигенов SARS-CoV-2/гриппа А/гриппа В в образце и не должен использоваться в качестве единого критерия диагностики инфекций, вызванных SARS-CoV-2/гриппом А/гриппом В.
5. Результаты, полученные тестом, следует рассматривать вместе с другими клиническими данными других лабораторных исследований и обследований.
6. Если результат теста отрицательный или нереактивный, а клинические симптомы сохраняются, рекомендуется провести повторный отбор образцов через несколько дней и провести повторное тестирование или тестирование с помощью молекулярной диагностики для исключения инфекции у этих лиц.
7. Тест покажет отрицательные результаты при следующих условиях: концентрация новых антигенов коронавируса, верусу гриппа А или вируса гриппа В в образце ниже минимального предела обнаружения теста.
8. Отрицательные результаты не исключают инфицирования SARS-CoV-2, особенно у тех, кто был в контакте с вирусом. Дальнейшее тестирование посредством молекулярной диагностики следует рассмотреть для исключения инфекции у этих лиц.
9. Отрицательный результат гриппа А или гриппа В, полученный с помощью этого набора, должен быть подтвержден методом ПЦР/культуры.
10. Избыток крови или муцина на образце мазка может препятствовать выполнению теста и может привести к ложноположительному результату.
11. Точность теста зависит от качества образца мазка. Ложноотрицательные результаты могут быть следствием неправильного сбора или хранения образцов.
12. Позитивные результаты на COVID-19 могут быть обусловлены инфицированием другими штаммами коронавируса, отличными от SARS-CoV-2, или другими факторами интерференции. Положительный результат гриппа А и/или В не исключает сопутствующей коинфекции другим патогеном, поэтому следует учитывать возможность наличия бактериальной инфекции.

ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) по сравнению с ведущими коммерческими тестами на ПЦР-антигены гриппа. Корреляция между этими двумя системами составляет не менее 98%.

Общая характеристика

Чувствительность, специфичность и точность

Комбинированный экспресс-тест определения антигенов COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки) был оценен на образцах, полученных от пациентов. ЗТ-ПЦР используется как комбинированный референс-метод проведения экспресс-теста для выявления антигенов COVID-19 и гриппа А+В (мазок из носоглотки). Образцы считались положительными, если ЗТ-ПЦР показывала положительный результат. Образцы считались отрицательными, если ЗТ-ПЦР показывала отрицательный результат.

Тест на COVID-19:

Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа A+B		ЗТ-ПЦР		Вместе
		Положительный	Отрицательный
Антигены COVID-19	Положительный	80	1	81
	Отрицательный	3	120	123
Вместе		83	121	204
Относительная чувствительность		96.4% (95%CI*: 89.8%~99.2%)
Относительная специфичность		99.2% (95%CI*: 95.5%~99.9%)
Точность		98.0% (95%CI*: 95.1%~99.5%)

Тест на грип А+В :

Комбинированный экспресс-тест на антигены COVID-19 и гриппа A+B		Тип А			Тип В
		ЗТ-ПЦР		Вместе	ЗТ-ПЦР		Вместе
		Положительный	Отрицательный		Положительный	Отрицательный
Грипп A+B	Положительный	38	2	40	39	2	41
	Отрицательный	2	215	217	3	213	216
Вместе		40	217	257	42	215	257
Относительная чувствительность		95.0% (95%CI*: 82.6%-99.5%)			92.9% (95%CI*: 80.3%-98.2%)
Относительная специфичность		99.1% (95%CI*: 96.5%-99.9%)			99.1% (95%CI*: 96.5%-99.9%)
Точность		98.4% (95%CI*: 95.9%-99.5%)			98.1% (95%CI*: 95.4%-99.3%)

*Доверительные интервалы

Тестирование специфичности с разными штаммами вирусов

Комбинированный экспресс-тест для определения антигенов COVID-19 и гриппа А+В был проверен со следующими вирусными штаммами. Не было обнаружено ни одной заметной линии ни на одном из участков тестовых линий при указанных концентрациях:

Тест на COVID-19:

Описание	Уровень теста
Аденовирус типа 3	3.16 x 104 TCID50/мл
Аденовирус типа 7	1.58 x 105 TCID50/мл
Коронавирус человека OC43	2.45 x 106 LD50/мл
Грипп A H1N1	3.16 x 105 TCID50/мл
Грипп A H3N2	1 x 105 TCID50/мл
Грипп B	3.16 x 106 TCID50/мл
Риновирус человека 2	2.81 x 104 TCID50/мл
Риновирус человека 14	1.58 x 106 TCID50/мл
Риновирус человека 16	8.89 x 106 TCID50/мл
Корь	1.58 x 104 TCID50/мл
Свинка	1.58 x 104 TCID50/мл
Вирус парагриппа 2	1.58 x 107 TCID50/мл
Вирус парагриппа 2	1.58 x 108 TCID50/мл
Вирус респираторно-синцитиальный	8.89 x 104 TCID50/мл

Тест на грипп А+В :

Описание	Уровень теста
Аденовирус типа 3	3.16 x 104 TCID50/мл
Аденовирус типа 7	1.58 x 105 TCID50/мл
Коронавирус человека OC43	2.45 x 106 LD50/мл
Риновирус человека 2	2.81 x 104 TCID50/мл
Риновирус человека 14	1.58 x 106 TCID50/мл
Риновирус человека 16	8.89 x 106 TCID50/мл
Корь	1.58 x 104 TCID50/мл
Свинка	1.58 x 104 TCID50/мл
Вирус парагриппа 2	1.58 x 107 TCID50/мл
Вирус парагриппа 3	1.58 x 108 TCID50/мл
Вирус респираторно-синцитиальный	8.89 x 104 TCID50/мл

TCID50 = (Tissue Culture Infectious Dose) Инфекционная доза для культуры тканей – это разведение вируса, которое при проведении анализа способно инфицировать 50% засеянных культуральных сосудов.

LD50 = (Lethal Dose) Летальная доза – это разведение вируса, которое в условиях проведения анализа может
ожидаемо убить 50% привитых мышат-сосунов.

Точность в пределах и между сериями

Точность внутри и между сериями была определена с помощью семи образцов стандартных средств контроля COVID-19 и гриппа А/В. Три разных партии комбинированного быстрого теста на антигены COVID-19 и гриппа A+B (мазок из носоглотки) были протестированы с использованием отрицательных результатов: слабый антиген SARS-COV-2, сильный антиген SARS-COV-2, слабый антиген гриппа A, слабый антиген гриппа B, сильный антиген гриппа A и сильный антиген гриппа B. Десять повторов каждого уровня тестировали каждый день в течение 3 дней. Образцы были правильно идентифицированы в количестве более 99% случаев.

Перекрестная реактивность

Следующие организмы были протестированы при 1,0х108 орг/мл и все оказались отрицательными при тестировании с помощью комбинированного быстрого теста на антигены COVID-19 и гриппа A+B (мазок из носоглотки):

Arcanobacterium	Pseudomonas aeruginosa
Candida albicans	Staphylococcus aureus subspaureus
Corynebacterium	Staphylococcus epidermidis
Escherichia coli	Streptococcus pneumoniae
Moraxella catarrhalis	Streptococcus pygenes
Neisseria lactamica	Streptococcus salivarius
Nesseria subllava	Streptococcus sp group F